Crispr-терапию серповидно-клеточной анемии испытали на человеческих клетках
Интернациональная группа исследователей испытала на клетках человека способ лечения сепровидно-клеточной анемии, основанный на технологии редактирования генома CRISPR/Cas9. Опробования разрешили удачно пересадить мышам стволовые кроветворные клетки человека с отредактированным геномом. Статья размещена в издании Nature.
Серповидно-клеточная анемия относится к бета-гемоглобинопатиям — болезням, каковые вызываются мутациями в гене одного из белков, входящих в состав гемоглобина — бета-глобина (HBB). Серповидно-клеточная анемия вызывается одиночной мутацией в гене HBB, приводящей к единичной аминокислотной замене в первичной последовательности бета-глобина, что, со своей стороны, ведет к тому, что гемоглобин начинает слипаться в агрегаты в эритроцитов.
Вследствие этого эритроциты чаще разрушаются и формируют тромбы, что ведет к нарушению кровоснабжения, анемии и ослаблению иммунитета. Не обращая внимания на то, что патогенез серповидно-клеточной анемии отлично изучен, на сегодня способов ее лечения не существует. Единственным довольно действенным методом терапии до тех пор пока остается достаточно страшная процедура по пересадке донорского костного мозга.
Наряду с этим серповидноклеточная анемия есть эргономичной мишенью для генетической терапии: с целью достижения лечебного результата достаточно отредактировать мутации гена бета-глобина в стволовых гемопоэтических (кроветворных) клетках. В случае если хотя бы часть эритроцитов, оказавшихся из отредактированных стволовых клеток, начнет создавать обычный бета-глобин, это разрешит купировать главные симптомы заболевания.
Ранее способ генетической терапии серповидноклеточной анемии, применяющий совокупность редактирования CRISPR/Cas9, был создан и удачно испытан на мышах. Совокупность редактирования основана на совместной работе рибонуклеопротеинов (комплексов белка-нуклеазы Cas9) и вектора на базе аденоассоциированного вируса. Вектор доставляет в гемопоэтическую стволовую клетку гомологичный донорский ген, по окончании чего в гене бета-глобина HBB происходит гомологичная рекомбинация.
После этого отредактированные стволовые клетки инъецируют обратно в кровоток.
В данном изучении авторы испытали обрисованный способ, отредактировав людские стволовые клетки и после этого пересадив их мышам. Инъецированные в кровоток мышей стволовые клетки человека по окончании дифференциации в эритроциты удачно экспрессировали зрелую матричную РНК бета-глобина. Это подтверждало наличие интактной регуляции транскрипции отредактированных аллелей HBB.
Опробования разрешили отредактировать более 90 процентов популяции стволовых клеток за счет созданной авторами методики по отбору удачно отредактированных стволовых клеток из неспециализированной культуры.
Кроме серповидно-клеточной анемии, разработку редактирования генома CRISPR/Cas9 (о том, как она трудится, возможно прочесть тут) уже испытывали, к примеру, для терапии диодистрофии Дюшена на мышах и лечения бета-талассемии — причем не на мышах, а на людских эмбрионах. О вторых последних тенденциях в области разработки возможно почитать тут.
Создатель: Софья Долотовская